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Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒說明書

 更新時間:2022-07-20 點擊量:1236

mediomics  Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒說明書

Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒,384 孔格式

貨號:1-1-1006

類別:384 孔板Bridge-It 檢測DNA 甲基化細(xì)胞內(nèi)信號L-蛋氨酸

標(biāo)簽:384 孔Bridge-ItL-MetL-蛋氨酸

Bridge-It® L-蛋氨酸 (L-Met) 熒光檢測試劑盒,384 孔格式

應(yīng)用:

  • 直接測量樣品中的 L-Met 水平

  • 使用 Met 作為底物或 Met 作為產(chǎn)物的酶(即蛋氨酸氨基肽酶)的測定

特征:

  • 簡單: 將測試樣品或標(biāo)準(zhǔn)品與檢測溶液混合并孵育

  • 快速: 孵育 50 分鐘后讀取熒光信號

  • 敏感: 檢測 L-蛋氨酸的檢測下限為 10 µM

  • 靈活: 檢測適用于低通量和高通量篩選形式


L-蛋氨酸和 Bridge-It® 熒光檢測的背景信息

L-蛋氨酸 (L-Met)
L-蛋氨酸是一種必需氨基酸,必須從食物來源或膳食補(bǔ)充劑中獲取。它是其他含硫氨基酸、半胱氨酸、牛磺酸和谷胱甘肽的前體。蛋氨酸與三磷酸腺苷反應(yīng)形成 S-腺苷蛋氨酸 (SAM),它是體內(nèi)主要的甲基供體,有助于合成許多重要物質(zhì),包括腎上腺素和膽堿。L-蛋氨酸也是動物飼料的重要補(bǔ)充劑。目前,L-蛋氨酸使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進(jìn)行定量。HPLC 耗時、昂貴,并且由于需要大量的有機(jī)溶劑,因此對環(huán)境不友好。

Bridge-It® L-蛋氨酸熒光 (L-Met) 檢測1,2

真核細(xì)胞含有大約 3,000 個序列特異性 DNA 結(jié)合蛋白。這些重要的蛋白質(zhì)在有或沒有特定的小分子共調(diào)節(jié)因子(配體)的情況下起作用,控制基因組 DNA 活性的所有方面,包括基因表達(dá)、DNA 復(fù)制和 DNA 修復(fù)。Mediomics 正在應(yīng)用其新型熒光檢測平臺開發(fā)體外檢測,用于快速、靈敏地量化 DNA 結(jié)合蛋白及其小分子配體的活性。

Mediomics Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法基于成熟的熒光測量技術(shù)和新的檢測平臺設(shè)計的結(jié)合,利用 DNA 結(jié)合蛋白作為其各自小分子輔助調(diào)節(jié)劑(配體)的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋氨酸抑制蛋白對其*的 DNA 結(jié)合位點的親和力在其配體 S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 的存在下大大增加。對于該測定,MetJ 共有序列被分成兩個大致相等的 DNA “半位點",其中一個片段用熒光素標(biāo)記,另一半片段用 Oyster® 645 熒光團(tuán)3,4標(biāo)記. 測試樣品中 SAM 的相對量將影響測定中 DNA-MetJ 蛋白復(fù)合物形成的量。當(dāng)這種復(fù)合物形成時,它會將熒光標(biāo)記的 DNA 半位點靠近并導(dǎo)致熒光信號發(fā)射發(fā)生可測量的變化(增加),這可以使用酶標(biāo)儀輕松測量(波長設(shè)置:吸收 485 nm;發(fā)射 665 nm )。在存在 ATP 和 Mg2+ 的情況下,L-甲硫氨酸很容易被 S-腺苷甲硫氨酸合成酶轉(zhuǎn)化為 SAM。使用 L-蛋氨酸標(biāo)準(zhǔn)曲線確定測試樣品中的 L-蛋氨酸濃度。

Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法具有非常理想的性能特征,包括高信噪比 (S/B)、良好的線性動態(tài)范圍和約 10 μM 的檢測限。總測定時間為 50 分鐘。

l-met-std-曲線

注:此標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供參考。請生成您自己的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

與 HPLC 程序相比,Bridge-It® L-蛋氨酸熒光檢測方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此,它非常適合快速、同時測量大量測試樣品中的 L-蛋氨酸水平。此外,這種方法很容易適應(yīng)目前用于藥物發(fā)現(xiàn)研究的高通量篩選平臺。

定價:  100 孔套件是一次性試用購買。





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